人腎癌細胞性質、用途與生產工藝

細胞來源

人腎癌細胞該細胞系1975年建系，源自一位63歲白人女性的初期透明細胞腺癌組織，細胞呈圓形且邊界不清，核漿比大，有微絨毛及橋粒。該細胞可在軟瓊脂上生長。

細胞復蘇

1）復蘇人腎癌細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）人腎癌細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

分析方法

STR基因分型方法是進行細胞交叉污染和性質鑒定的最有效和準確的方法之一，STR基因分型應用于細胞鑒定已被ATCC等機構強烈推薦。美國的ATCC細胞庫、德國的DSMZ細胞庫以及日本的JCRB細胞庫等為STR分型提供了各細胞株的數(shù)據(jù)供比對。越來越多的雜志在投稿時要求撰稿人提供細胞STR分析數(shù)據(jù)，STR已被ATCC等機構作為細胞鑒定的金標準。

處理方法

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

A-498細胞

A-498細胞來源于一名52歲的女性腎癌患者的腎組織，是NCI-60 panel的“經典”腎細胞癌細胞株，具有VHL基因突變，提示為腎透明細胞癌。也有學者認為A-498為乳頭狀腎細胞癌，因為其異種移植瘤組織學呈現(xiàn)乳頭狀腎細胞癌形態(tài)學特征，8號染色體和MYC分析也傾向為乳頭狀腎細胞癌。不過目前大多數(shù)研究人員還是把A-498細胞當做腎透明細胞癌細胞株來進行研究。

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