產(chǎn)品概述

PHARMALYTE 5-8（貨號(hào)：17045301）是Cytiva（原GE Healthcare）生產(chǎn)的高性能兩性電解質(zhì)緩沖液，專為等電聚焦（Isoelectric Focusing, IEF）電泳設(shè)計(jì)。該產(chǎn)品覆蓋pH 5-8的寬范圍，能夠形成連續(xù)的pH梯度，精準(zhǔn)分離具有不同等電點(diǎn)（pI）的蛋白質(zhì)、多肽及其他兩性分子，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)組學(xué)研究、疾病標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)及生物制藥質(zhì)量控制等領(lǐng)域。

核心技術(shù)特性

1. 寬pH范圍覆蓋

• 覆蓋pH 5至8的線性梯度，適用于大多數(shù)生物樣本中蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)分布（多數(shù)蛋白質(zhì)pI位于4-7之間）。

• 梯度穩(wěn)定性高，電泳過程中pH變化≤0.1單位，確保分離結(jié)果的重現(xiàn)性。

2. 高緩沖容量

• 含多種兩性離子（如AMPHOLINE?聚合物），可有效抵抗電泳過程中的pH波動(dòng)，維持穩(wěn)定的分離環(huán)境。

• 緩沖容量達(dá)50-70 mEq/L，支持長(zhǎng)時(shí)間電泳（>12小時(shí)）而不發(fā)生梯度崩潰。

3. 低背景干擾

• 無熒光背景，兼容考馬斯亮藍(lán)、銀染及熒光染色等多種檢測(cè)方式。

• 離子強(qiáng)度低（<10 mS/cm），減少對(duì)下游質(zhì)譜分析（如MALDI-TOF）的抑制作用。

4. 即用型配方

• 預(yù)混兩性電解質(zhì)與尿素、Nonidet P-40等添加劑，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)流程。

• 無需額外調(diào)節(jié)pH或添加載體兩性電解質(zhì)，直接稀釋使用。

科學(xué)應(yīng)用領(lǐng)域

1. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究

• 一維等電聚焦-二維SDS-PAGE（2D-PAGE）的核心試劑，用于構(gòu)建高分辨率蛋白質(zhì)圖譜。

• 分離復(fù)雜樣本（如血清、細(xì)胞裂解液）中的低豐度蛋白，提升疾病標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)效率。

2. 生物制藥質(zhì)量控制

• 監(jiān)測(cè)單抗藥物電荷異構(gòu)體，確保批次間一致性。

• 分析重組蛋白翻譯后修飾（如脫酰胺、氧化），優(yōu)化生產(chǎn)工藝。

3. 臨床診斷開發(fā)

• 分離疾病相關(guān)蛋白變體（如糖基化異常蛋白），輔助診斷試劑盒開發(fā)。

• 結(jié)合免疫印跡技術(shù)，檢測(cè)自身免疫病相關(guān)自身抗體。

操作優(yōu)勢(shì)

1. 兼容性廣泛

• 適用于多種等電聚焦系統(tǒng)（如IPGphor、ZOOM? IEF系統(tǒng)）。

• 可與IPG膠條（pH 3-10 NL、pH 4-7）聯(lián)用，擴(kuò)展分離范圍。

2. 實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)化

• 無需預(yù)平衡步驟，直接與樣本混合后上樣。

• 支持快速電泳模式（如1小時(shí)聚焦程序），縮短實(shí)驗(yàn)周期。

3. 結(jié)果可重復(fù)性高

• 批間CV值<5%，滿足定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究需求。

• 提供詳細(xì)實(shí)驗(yàn)協(xié)議及梯度優(yōu)化指南，降低操作誤差。

使用注意事項(xiàng)

• 避免反復(fù)凍融，分裝后-20℃保存可延長(zhǎng)有效期至24個(gè)月。

• 電泳前需徹底脫氣，防止氣泡干擾聚焦過程。

• 高鹽樣本（>150 mM NaCl）需預(yù)先透析或超濾處理，避免電流過大。

質(zhì)量控制

• 每批次產(chǎn)品均通過HPLC檢測(cè)純度（>95%），并驗(yàn)證pH梯度形成能力。

• 無內(nèi)毒素（<0.1 EU/mL），支持細(xì)胞實(shí)驗(yàn)及體內(nèi)研究。

• 提供COA（分析證書）及SDS（安全數(shù)據(jù)表），確保合規(guī)使用。

總結(jié)

PHARMALYTE 5-8憑借其寬pH范圍、高緩沖容量及低背景干擾特性，已成為等電聚焦電泳領(lǐng)域的標(biāo)桿產(chǎn)品。從基礎(chǔ)蛋白質(zhì)組學(xué)研究到生物制藥開發(fā)，該產(chǎn)品為科研工作者提供了高效、可靠的分離工具，助力揭示生命活動(dòng)的分子機(jī)制。