核酸內(nèi)切酶 IV(Endonuclease IV,Endo IV)又稱Nfo,來源于 重組E.coli,參與 DNA 損傷修復(fù)。
該酶主要功能是識別DNA 雙鏈分子上的脫嘌呤/脫嘧啶(AP)位點,并切割 AP 位點 5′ 端的第一個磷酸二酯鍵,產(chǎn)生 3′ 羥基和 5′ 脫氧核糖磷酸末端(deoxyribose phosphate, dRP)。另外該酶還具有 3′二酯酶活性,能從 DNA 的 3′末端釋放磷酸甘油醛、完整的脫氧核糖 5′-磷酸和磷酸。該酶的最佳底物為 AP 雙鏈 DNA,但對 AP 單鏈 DNA 也有一定活性。
貨號
ZSNfo3801 / ZSNfo3802
規(guī)格
1000 U / 5000 U
來源
E.coli
酶活定義
1 單位定義:一單位指在 10μl 反應(yīng)體系中,37°C 反應(yīng)15min,切割 1 pmol 含一個 AP 位點的 34mer 寡核苷酸雙鏈,所需要的酶量。
AP位點的創(chuàng)建方法:在37℃,使用1個酶單位的尿嘧啶-DNA糖基酶UDG(Cat#14455ES)處理10 pmol含有一個尿嘧啶堿基的34 bp的寡核苷酸雙鏈,反應(yīng)2 min 。
酶保存液
10 mM Tris-HCl, 250 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.15 % Triton?X-100, 200 μg/ml BSA, 50 % Glycerol, pH 7.4 @25℃
濃度
(10 U/uL)
純度
≥90%(SDS-PAGE)
熱失活
85°C,20min
儲存
置于-20°C 可保存 2 年,避免反復(fù)凍融。
應(yīng)用
? DNA 損傷和修復(fù)研究
? 單細胞電泳(彗星試驗)
? 抗腫瘤藥物研究
? DNA 結(jié)構(gòu)研究
? SNP 分析
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