"C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜
【培養(yǎng)觀察】
定期觀察C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜生長狀態(tài),注意培養(yǎng)基的pH值變化和細(xì)胞密度,及時(shí)換液和傳代。
【細(xì)胞復(fù)蘇】
復(fù)蘇細(xì)胞時(shí),應(yīng)快速將凍存管從液氮中取出并置于37℃水浴中解凍,然后轉(zhuǎn)移到含新鮮培養(yǎng)基的無菌管中并吹打混勻。整個(gè)復(fù)蘇過程應(yīng)盡可能在5-10分鐘內(nèi)完成,以確保細(xì)胞的高存活率。
【細(xì)胞傳代】
傳代時(shí),應(yīng)使用適量的胰蛋白酶溶液進(jìn)行消化,并在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況。消化下來的細(xì)胞容易成團(tuán),需要吹打吹散。傳代后,應(yīng)確保細(xì)胞均勻分布在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。一般使用凍存液進(jìn)行凍存,并置于液氮中儲(chǔ)存。
【C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜英文別名】
C3H/10T1/2-clone8; C3H/10T1/2 CL8; C3H10T1/2 clone8; C3H10T1/2CL8; 10T1/2(clone8); 10T1/2; C3H10T1-2; C3H10T1/2; C3H-10T1/2; C3H 10T1/2; C3H/10T1/2
烘箱(干燥箱)的干熱滅菌功能對(duì)玻璃器皿至關(guān)重要。鼓風(fēng)式設(shè)計(jì)確保160℃高溫下熱量均勻分布,但操作中存在三個(gè)技術(shù)要點(diǎn):一是必須同步啟動(dòng)鼓風(fēng)與加熱功能,避免局部過熱;二是100℃以下才能開啟箱門,防止玻璃器皿因驟冷破裂;三是需使用耐高溫牛皮紙包裹器械,普通棉質(zhì)材料在高溫下碳化產(chǎn)生的微??赡苡绊懠?xì)胞貼壁。有新研發(fā)的真空烘箱將滅菌時(shí)間縮短30%,同時(shí)降低能源消耗。
當(dāng)T25瓶復(fù)蘇細(xì)胞收到貨時(shí),請(qǐng)觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,將T25細(xì)胞瓶壁進(jìn)行75%酒精消毒,將T25瓶置于37度培養(yǎng)箱放置2-4h,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行首次傳代培養(yǎng);干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞凍存管收到貨后,需立即轉(zhuǎn)入液氮保存或直接進(jìn)行復(fù)蘇(第三天換液并檢查復(fù)蘇細(xì)胞密度,以便進(jìn)行下一步)。 能夠在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行大量培養(yǎng)和繁殖。這種細(xì)胞系在分子生物學(xué)和生物技術(shù)研究中十分常用。
【背景信息】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
【傳代比例】
1:2-1:4(C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜首次傳代建議1:2)
【來源說明】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜主要來源ATCC、ECACC、DSMZ、RCB等細(xì)胞庫
【生長特性】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜貼壁生長
【形態(tài)特性】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜上皮細(xì)胞樣
【換液周期】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜每周2-3次
【產(chǎn)品包裝】
復(fù)蘇發(fā)貨:C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存發(fā)貨:1ml凍存管(兩支)
在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),經(jīng)常發(fā)現(xiàn)它們的狀態(tài)不太理想,總是像一群頑皮的孩子般扎堆生長。用胰酶消化時(shí),它們更是抱團(tuán)取暖,形成一個(gè)個(gè)緊密的細(xì)胞團(tuán)塊,即使用移液管反復(fù)吹打也難以將它們分散成單個(gè)細(xì)胞。更令人困擾的是,它們的生長速度猶如雨后春筍,卻極不均勻,傳代第二天,某些區(qū)域就已擁擠得如同早高峰的地鐵車廂。
細(xì)胞經(jīng)過多次傳代后,建立了穩(wěn)定的體外培養(yǎng)模型且可穩(wěn)定增殖。這些微小的生命單元在培養(yǎng)瓶中生生不息,恰似一支訓(xùn)練有素的軍團(tuán),為科學(xué)家們科研實(shí)驗(yàn)提供著源源不斷的創(chuàng)新靈感與技術(shù)支持。其價(jià)值不僅體現(xiàn)在當(dāng)前廣泛的應(yīng)用中,更在于它為未來生命科學(xué)研究提供的可能性。隨著技術(shù)的進(jìn)步和對(duì)這一細(xì)胞系認(rèn)識(shí)的深入,必將在更多領(lǐng)域展現(xiàn)其獨(dú)特優(yōu)勢。研究人員在使用時(shí)應(yīng)當(dāng)充分了解其特性,合理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),并注意細(xì)胞培養(yǎng)的質(zhì)量控制,以確保研究結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性。
【物種來源】
C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜來源于人源、鼠源等其它物種來源
【培養(yǎng)條件】
37°C、5%CO?、飽和濕度環(huán)境,使用含10%-20%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
【消化傳代】
使用0.25%胰酶-EDTA溶液,37°C孵育1-2分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶促進(jìn)細(xì)胞脫落。(懸浮細(xì)胞可省略這步操作)
【污染防控】
嚴(yán)格無菌操作,定期檢測支原體污染,必要時(shí)使用雙抗預(yù)防細(xì)菌污染。
【細(xì)胞狀態(tài)】
傳代和消化過程中,應(yīng)密切關(guān)注細(xì)胞狀態(tài),避免過度消化或機(jī)械損傷導(dǎo)致細(xì)胞活性下降。
【污染檢測】
支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性。
【細(xì)胞接收流程】
收到細(xì)胞后,應(yīng)首先觀察細(xì)胞狀態(tài),然后進(jìn)行75%酒精消毒處理。將細(xì)胞置于37℃培養(yǎng)箱中放置2-4小時(shí)以穩(wěn)定C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜狀態(tài)。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),即可進(jìn)行首次傳代培養(yǎng)。
【操作規(guī)范】
在細(xì)胞培養(yǎng)和處理過程中,需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)范,以避免細(xì)胞污染和交叉污染。
【消化條件】
室溫下用胰酶消化1-3分鐘。
【生物安全等級(jí)】
1級(jí)。
【空泡現(xiàn)象】
在密集培養(yǎng)時(shí),細(xì)胞中可見巨大的空泡,這是細(xì)胞的正常特性,無需擔(dān)心。
【血清比例】
使用10%-20%的血清濃度有助于優(yōu)化C3H/10T1/2 clone 8 Cells小鼠胚胎成纖維細(xì)胞低代次保種|STR圖譜實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。這一濃度范圍經(jīng)過多年實(shí)驗(yàn)和實(shí)踐的驗(yàn)證,被認(rèn)為是較為適宜的選擇。
細(xì)胞傳代準(zhǔn)備工作:預(yù)熱培養(yǎng)基和PBS:在開始傳代前,將完全培養(yǎng)基和磷酸鹽緩沖液(PBS),預(yù)熱至37℃,以確保細(xì)胞在操作過程中不會(huì)受到溫度沖擊。準(zhǔn)備無菌器材:包括無菌吸管、移液槍、離心管、培養(yǎng)皿、胰蛋白酶(或EDTA)溶液、完全培養(yǎng)基等。檢查細(xì)胞狀態(tài):在顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長密度和形態(tài),確保細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長期且狀態(tài)良好。
細(xì)胞凍存過程中,密度過低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞在復(fù)蘇時(shí)因缺乏足夠的細(xì)胞間接觸和旁分泌信號(hào)而存活率下降。當(dāng)凍存密度低于1×10^6 cells/mL時(shí),細(xì)胞在解凍后可能面臨以下問題:營養(yǎng)競爭不足:低密度下細(xì)胞分泌的促存活因子(如生長因子)濃度不足,無法有效支持細(xì)胞貼壁和增殖;物理損傷加劇:凍存時(shí)形成的冰晶會(huì)破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),而高密度細(xì)胞群可通過相互緩沖減輕機(jī)械損傷;氧化應(yīng)激增加:單個(gè)細(xì)胞暴露在凍存液中的表面積更大,更容易受到自由基攻擊。
GCT Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
BV-2 Cells;背景說明:源于C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞,表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因,表面表達(dá)envgp70抗原,在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。;傳代方法:1:6傳代;2-3天1次。;生長特性:半貼壁生長;形態(tài)特性:多形型;相關(guān)產(chǎn)品有:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞
VMM-5A Cells;背景說明:黑色素瘤;神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
K299 Cells;背景說明:間變性大細(xì)胞淋巴瘤;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CL34細(xì)胞、H-2347細(xì)胞、NK-92細(xì)胞
H-1651 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:3-1:8傳代,每周換液2次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
GM09749 Cells(提供STR鑒定圖譜)
HAP1 BCHE (-) 2 Cells(提供STR鑒定圖譜)
OCI-AML4 Cells;背景說明:急性髓系白血??;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HCC-94細(xì)胞、F36P細(xì)胞、Colo320細(xì)胞
H-1963 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:每周換液2次。;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:CTX TNA2細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞
LLC PK1 Cells;背景說明:腎;自發(fā)永生;Hampshire;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
Alexander Cells;背景說明:該細(xì)胞系分泌乙肝病毒表面抗原(HBsAg)。 此細(xì)胞系原先被支原體污染,后用BM-cycline去除支原體;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞
H-1770 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:隨細(xì)胞的生長而換液;生長特性:懸浮生長;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:RSC 96細(xì)胞、Fetal Human Lens-124細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞
Hs863T Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:NCIH1836細(xì)胞、LC-1細(xì)胞、RDES-1細(xì)胞
SGC996 Cells;背景說明:膽囊癌;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:HEI-193細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞、SNU-407細(xì)胞
SNU-668 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Mac-1細(xì)胞、EU-4細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞
HG03193 Cells(提供STR鑒定圖譜)
iCB5 Cells(提供STR鑒定圖譜)
LM00031 Cells(提供STR鑒定圖譜)
NCI-H1882 Cells(提供STR鑒定圖譜)
PathHunter CHO-K1 MRGPRX4 beta-arrestin Cells(提供STR鑒定圖譜)
Ubigene HeLa PIP4K2A KO Cells(提供STR鑒定圖譜)
XP1WA Cells(提供STR鑒定圖譜)
HG02009 Cells(提供STR鑒定圖譜)
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14 Cells;背景說明:腎癌;男性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
CAL-12T Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:BEL-7404細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞、NCI-HUT-292細(xì)胞
HS-766T Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2—1:8傳代,每周換液2—3次;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞
NCI-H102 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代;生長特性:懸浮生長 ;形態(tài)特性:圓形;淋巴母細(xì)胞樣;相關(guān)產(chǎn)品有:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
RKN Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
RKN Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮細(xì)胞;相關(guān)產(chǎn)品有:Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
CHL/IU Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:NCI-747細(xì)胞、DoTc2細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞
Panc8.13 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2傳代;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
HGC27 Cells;背景說明:未分化胃癌,能分泌粘液素。;傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿;生長特性:貼壁生長;形態(tài)特性:上皮樣;相關(guān)產(chǎn)品有:SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
BE2-M17 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:COLO680N細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞、SW1222細(xì)胞
RIN-m Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
RIN-14B Cells;背景說明:胰島素瘤;雄性;NEDH;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Uhth-74細(xì)胞、TE11細(xì)胞、TE10細(xì)胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50 Cells;背景說明:視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤;女性;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:懸浮;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
H1522 Cells;背景說明:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹;傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。;生長特性:貼壁或懸浮,詳見產(chǎn)品說明書部分;形態(tài)特性:詳見產(chǎn)品說明書;相關(guān)產(chǎn)品有:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
DB Cells人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞|有STR圖譜
HMC3 Cells人小膠質(zhì)細(xì)胞|有STR圖譜
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NCI-H2030 Cells人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞|有STR圖譜
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SK-OV-3+luc Cells人卵巢癌細(xì)胞|有STR圖譜
4T1 Cells小鼠乳腺癌細(xì)胞|有STR圖譜
MR1 Cells小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞|有STR圖譜
COLO 320DM Cells人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞|有STR圖譜
Mono-Mac-6 Cells人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞|有STR圖譜
UMR-106 Cells大鼠骨肉瘤細(xì)胞|有STR圖譜
A172-LUC Cells人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞|有STR圖譜
F81 Cells貓腎細(xì)胞|有STR圖譜
MDS-L Cells人骨髓增生異常綜合征細(xì)胞|有STR圖譜
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關(guān)鍵字: C3H/10T1/2 clone 8 C;復(fù)蘇細(xì)胞系;細(xì)胞STR鑒定報(bào)告;細(xì)胞STR鑒定圖譜;ATCC|DSMZ細(xì)胞庫;
公司提供ATCC、DSMZ、ECACC、NCI-DTP、RCB(Riken)等細(xì)胞系