產(chǎn)品簡(jiǎn)介 Calcein, AM,中文名鈣黃綠素乙酰甲酯,CAS NO:148504-34-1,一種具細(xì)胞膜滲透性的活細(xì)胞熒光染料,呈綠色熒光(Ex/Em= 490nm/515nm)。AM基團(tuán)的存在不僅加強(qiáng)疏水性,使其能輕易穿透活細(xì)胞膜。而且封閉結(jié)合鈣離子的分子部分,本身不發(fā)熒光。一旦進(jìn)入細(xì)胞后,被細(xì)胞內(nèi)酯酶水解為鈣黃綠素(calcein),能與胞內(nèi)鈣離子結(jié)合,產(chǎn)生強(qiáng)烈的綠色熒光。因不具有細(xì)胞膜滲透性,從而被保留在胞內(nèi)。與其它活細(xì)胞染料(如BCECF-AM,CFDA)相比,Calcein, AM最適合用于活細(xì)胞染色探針,因細(xì)胞毒性很低,而且不會(huì)抑制任何細(xì)胞功能如增殖或淋ba細(xì)胞趨化性。另外,使用Calcein, AM活性檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果十分可信,與標(biāo)準(zhǔn)的51Cr釋放法所得結(jié)果一致。
由于死細(xì)胞缺乏酯酶,Calcein, AM僅用于對(duì)活細(xì)胞的細(xì)胞生存能力測(cè)試和短期標(biāo)記。作為核染色染料的碘化丙啶不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):535 nm,發(fā)射:617 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。而用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。根據(jù)以上特點(diǎn),Calcein, AM和PI經(jīng)常被結(jié)合用來(lái)作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同,我們建議個(gè)別確定 Calcein, AM 和 PI的合適濃度。
本品為粉末形式提供的Calcein-AM,超純級(jí)別(≥95%),可與碘化丙啶(PI)(Cat No FS1202)聯(lián)合使用,用于活細(xì)胞和死細(xì)胞的同時(shí)檢測(cè)。或者直接購(gòu)買Calcein-AM/PI活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒(Cat No. FS1161)。
運(yùn)輸與保存方法
冰袋運(yùn)輸:-20℃避光干燥保存, 1年有效。
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