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SF17（人腦瘤細胞）
生長培養(yǎng)基：RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶
貼壁細胞傳代培養(yǎng)：
1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基。
2. 加入1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3至5分鐘（此處為12.5 cm2培養(yǎng)瓶所用體積，可根據(jù)實際情況增減用量）。
3. 加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落，并使細胞分散。
4. 離心200x g/5 min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。
5. 將細胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
傳代比例：建議 1:6 至 1:9
培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。
懸浮細胞傳代培養(yǎng)：
懸浮細胞的傳代可通過補加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成，具體做法如下：
1. 取出少量細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測，當細胞密度達到1×106 cells/mL 時，進行細胞傳代培養(yǎng)。
2. 取足量細胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，將細胞密度維持在2-3×105cells/mL。
3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度，則進行傳代培養(yǎng)。
培養(yǎng)基換液: 每隔2至3天。
注意：培養(yǎng)瓶應使用帶濾膜瓶蓋以保持培養(yǎng)基與空氣和CO2
拆包 & 存儲：
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液
2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)
培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟：
對于貼壁培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落。
1. 收到細胞產(chǎn)品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因在運輸過程中存在顛簸，且有些細胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。
2. 對于貼壁培養(yǎng)的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細胞置于含有5% CO2的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶，請立即傳代。
3. 對于懸浮培養(yǎng)的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞，轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5% CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
凍存細胞操作步驟：
注意：為保存細胞的高存活率，請收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。
1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。
2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。
4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。
5. 將細胞置于含有5%CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞產(chǎn)品的售后政策：
1、收到細胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細菌、真菌、霉菌污染，72小時檢測支原體陽性無條件重發(fā)；
2、享有1個月的超長售后免責期；
3、1個月內(nèi)，如果第三方鑒定STR錯誤，可退細胞款項。
4. 細胞運輸途中遭遇的問題：丟件、瓶身破損、培養(yǎng)液滲漏；
5. 細胞污染問題，請在收到產(chǎn)品24小時內(nèi)，給我們提供真實有效實驗結果，供核實；
6. 常溫發(fā)貨的細胞經(jīng)過24小時靜置后，有大部分細胞未存活（需提供真實、清晰的細胞狀態(tài)照片）
7. 干冰凍存管發(fā)貨的細胞復蘇之后，有大部分細胞未存活（需提供真實、清晰的細胞狀態(tài)照片）；
關鍵字： SF17;人腦瘤細胞;
上海鈺博生物科技有限公司是2012年5月由“海歸”組成的創(chuàng)業(yè)團隊與兩個專業(yè)投資機構發(fā)起成立的，以
開發(fā)生產(chǎn)科研試劑和特色檢驗產(chǎn)品為方向，經(jīng)過兩年多的努力，已經(jīng)建立了免疫學和分子生物學的五個技術平臺，開發(fā)了ELISA/ELISpot酶聯(lián)免疫試劑盒、重組蛋白、熒光標記抗體、四聚體(Tetramer)特異性T細胞檢測試劑盒、Aimplex流式高通量多因子檢測、microRNA表達譜分析和功能研究等系列產(chǎn)品和服務，與國內(nèi)外免疫學、干細胞、傳染病和腫瘤研究及臨床檢驗領域的科學家們建立了良好的合作關系，形成了一定的品牌影響力。鈺博生物另建有七大技術服務平臺（ELISA定制服務，免疫學檢測服務、分子生物學技術服務、蛋白表達與純化技術服務、抗體制備技術服務、細胞培養(yǎng)技術服務、整體實驗課題服務。用專業(yè)的知識、專業(yè)的設備、專業(yè)的態(tài)度為客戶提供一站式實驗技術服務！