"RD-ES Cell:尤因氏肉瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
SUNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141B細胞、NCIH1930細胞、NCIH446細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
RD-ES Cell:尤因氏肉瘤細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:8傳代:每周換液2-3次
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
H-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV522細胞、EOC20細胞、RBL 1細胞
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
細胞生長特性:貼壁和懸浮混合
RD-ES Cell:尤因氏肉瘤細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮樣
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞
EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
RPVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞
RD-ES Cell:尤因氏肉瘤細胞系
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
R D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 120細胞、MDA-MB-175VII細胞、SUM 149細胞
MOLT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKBML細胞、NE1-E6E7細胞、BEL-7402細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
COLO 829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細胞、Swiss3T3細胞、SK-UT-1細胞
BALB/3T3 cl. A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細胞、HEK 293-F細胞、CTV-1細胞
CHP 212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細胞、H-1155細胞、KMS-11細胞
RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
LICR-LON-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW-38細胞、HOP-62細胞、H2023細胞
Sp2/0-Ag-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1404細胞、SW 1463細胞、MCAEC細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
Porcine Kidney-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801C細胞、LS-1034細胞、8305C_1細胞
SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
LM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231-LM2-4175細胞、TCC Sup細胞、149PT細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
CA46細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-69細胞、C22 (Clara)細胞、Kasumi-6細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
CCD19-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCD-MLA-144細胞、NG 108-15細胞、AAV-293細胞
MCF 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-GP細胞、MyLa2059細胞、NCI-H2444細胞
KATOIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-841細胞、Z310細胞、NIH:OVCAR-4細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
OUMS27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
Hs895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
A-1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-29細胞、HuTu-80細胞、6-T CEM細胞
BDCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML2細胞、Plaepi 34細胞、SUIT-2細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
LA 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
MDA 1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC2/Ad細胞、Huh-7.5.1細胞、HCC2185細胞
RD-ES Cell:尤因氏肉瘤細胞系
OVCAR 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCC1細胞、HIEC細胞、NPA-87細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
NCI-H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL2141細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞、OVCA432_Bast細胞
RPMI7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
RPMI 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞
GFP-Olig2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE細胞、AML 12細胞、NCIH1618細胞
JROECL19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞
NCI-H510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞
Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細胞、SU86_86細胞、SCC9細胞
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