"SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細胞系 細胞背景資料:該細胞系源于一位60歲的白人女性患者的肺腺癌組織。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! RPTC細胞系相關產(chǎn)品:MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞 HT115細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞 MPC11細胞系相關產(chǎn)品:GalK 1細胞、H1238細胞、CF-PAC1細胞 細胞生長:貼壁 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質,應立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2次。 HCC827細胞系相關產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞 MOLT16細胞系相關產(chǎn)品:J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞 UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品:118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞 P3X63 Ag8細胞系相關產(chǎn)品:H-2291細胞、FCCH1024細胞、SU-DHL6細胞 293E細胞系相關產(chǎn)品:INS-1E細胞、LS 174 T細胞、SHP77細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 Panc-08.13細胞系相關產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞 KU19-19細胞系相關產(chǎn)品:LTEPa2細胞、GalK1細胞、PLB-985細胞 WRL-68細胞系相關產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞 Alexander細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞 Y3Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞 UM-UC3細胞系相關產(chǎn)品:HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞 AN-3細胞系相關產(chǎn)品:U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞 Normal Rat Kidney-49F細胞系相關產(chǎn)品:A-172MG細胞、Tu177細胞、HCC-1419細胞 Kasumi-6細胞系相關產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細胞系 KYSE 520細胞系相關產(chǎn)品:H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞 TM3細胞系相關產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 SKOV-3細胞系相關產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞 NCI-H508細胞系相關產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞 SUD6細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1623細胞、RCS細胞、Walker-256-TC細胞 2PK-3細胞系相關產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞 2PK-3細胞系相關產(chǎn)品:OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞 HCT/FU細胞系相關產(chǎn)品:Hs 27細胞、Panc-1-P細胞、HUVSMC細胞 Panc02細胞系相關產(chǎn)品:P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞 WEHI-279細胞系相關產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞 MA-c細胞系相關產(chǎn)品:H69/P細胞、UMUC-3細胞、Alexander cells細胞 HCC1359細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞 JB6 Cl 30-7b細胞系相關產(chǎn)品:T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞 SNU878細胞系相關產(chǎn)品:L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞 YD15細胞系相關產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 OVCAR-420細胞系相關產(chǎn)品:LICR-HN-6細胞、MDA435細胞、SNU-216細胞 H-1299細胞系相關產(chǎn)品:T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞 SK-N-BE(1)n細胞系相關產(chǎn)品:NSC34細胞、H-2023細胞、EAHY-926細胞 RIN m5F細胞系相關產(chǎn)品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞 PIG3細胞系相關產(chǎn)品:HT 29細胞、786-O RCC細胞、JURKAT E-61細胞 LY-R細胞系相關產(chǎn)品:EJ1細胞、A498細胞、Colon-26細胞 Hs888 Lu細胞系相關產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞 SF 763細胞系相關產(chǎn)品:GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細胞系相關產(chǎn)品:AGS細胞、P388.D1細胞、P3X63 AG8-653細胞 GOS-3細胞系相關產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞 HS 683T細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H522細胞、U266細胞、3T3-Swiss細胞 PLA801C細胞系相關產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞 COLO-1細胞系相關產(chǎn)品:Hs 766T細胞、OACP4 C細胞、Hs-675-T細胞 MEC-1細胞系相關產(chǎn)品:HPAF-I細胞、HCC-2935細胞、NCI-H889細胞 B16 BL6細胞系相關產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞 AZ521細胞系相關產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞 NHRF細胞系相關產(chǎn)品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 H-220細胞系相關產(chǎn)品:Cor L51細胞、SV-HUC-1細胞、PK 15細胞 A253細胞系相關產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞 GRSL細胞系相關產(chǎn)品:Granta519細胞、DBTRG-05MG細胞、NCI-H1836細胞 TC-1[JHU-1]細胞系相關產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 OCILY-10細胞系相關產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞 293 HEK細胞系相關產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 293 HEK細胞系相關產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞 293GP細胞系相關產(chǎn)品:BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞 HEYA8細胞系相關產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 MCMEC細胞系相關產(chǎn)品:IB-RS2細胞、HUT28細胞、PC-3/M細胞 SNU5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細胞、Hela-Ap-1細胞、HEK 293-EBNA細胞 LC1/Sq細胞系相關產(chǎn)品:Hs 822.T細胞、Be-Wo細胞、HCC-1806細胞 AG 9細胞系相關產(chǎn)品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞 MKN 7細胞系相關產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞 H1688細胞系相關產(chǎn)品:T/G HA VSMC細胞、KLM1細胞、HEL-299細胞 D283MED細胞系相關產(chǎn)品:Lu99A細胞、HEK293S細胞、DoTc2細胞 SNB-19細胞系相關產(chǎn)品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞 KMS11細胞系相關產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 HPAF/CD18細胞系相關產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細胞系 TO 175.T細胞系相關產(chǎn)品:RAW264.7細胞、HCC70細胞、SCL2細胞 H2196細胞系相關產(chǎn)品:LA-N-6(OAN)細胞、ROS1728細胞、SW 1783細胞 Cates-1B細胞系相關產(chǎn)品:BHK 21細胞、EFM-192C細胞、NCI-SNU-475細胞 WRL-68細胞系相關產(chǎn)品:LS411細胞、JVM2細胞、NCI-H711細胞 "
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