臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒

中文名稱：臺盼藍(lán)染色法細(xì)胞活力檢測試劑盒

英文名稱：Typan Blue Staining Cell Viability Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T|500T

本試劑盒各組分均以無菌形式提供，可直接用于細(xì)胞實驗。臺盼藍(lán)（Trypan Blue），一種偶氮、親水性酸性藍(lán)色染料，可透過死亡細(xì)胞和垂死細(xì)胞的細(xì)胞膜，將其染成藍(lán)色，而活細(xì)胞由于其細(xì)胞膜的完整性，可將臺盼藍(lán)排斥在外，因此，通過顏色的變化即可將活細(xì)胞（活細(xì)胞呈透明無色）和死細(xì)胞鑒別開來，基于此原理，本品廣泛用于細(xì)胞活性水平的常規(guī)評估。臺盼藍(lán)還可染色膠原和淀粉樣蛋白。臺盼藍(lán)與蛋白結(jié)合形成的復(fù)合物可發(fā)出紅色熒光。另外，臺盼藍(lán)（合適濃度）還常用來淬滅細(xì)胞表面的自熒光或者其他熒光信號。

使用方法

1）對于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，對其充分清洗后，加入適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞制成單細(xì)胞懸液；對于貼壁細(xì)胞，先用胰酶消化細(xì)胞，再按照懸浮細(xì)胞的方法制備單細(xì)胞懸液。
2）取0.1ml單細(xì)胞懸液，按照1:1比例與0.1ml 0.4%臺盼藍(lán)染色液充分混勻，室溫染色3~10min。
【注】：因臺盼藍(lán)具有細(xì)胞毒性，染色時間過久會導(dǎo)致部分死細(xì)胞染色，干擾計數(shù)。通常染色3min即可。
3）取少量上述染色細(xì)胞加入血細(xì)胞計數(shù)板，于顯微鏡低倍鏡下計數(shù)，分別計算著色細(xì)胞（即損傷細(xì)胞和死細(xì)胞）和總細(xì)胞。
【注1】：用移液槍加染色細(xì)胞時，沿著蓋玻片的邊緣輕輕加液使其完全覆蓋住整個小室。不可過量加液或者不足量。
【注2】：1mm2方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)通?？刂圃?0-50 cells，當(dāng)細(xì)胞數(shù)超過200個，需重新調(diào)整稀釋倍數(shù)。
4）按照以下公式來計算細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞百分比，
a，計算每ml細(xì)胞數(shù)目：Cells/ml=1mm2大方格內(nèi)的平均細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×104；【注】：此時的稀釋倍數(shù)為：步驟2所取的單細(xì)胞懸液與臺盼藍(lán)染色液混合后的稀釋倍數(shù)
b，總細(xì)胞數(shù)目：Total cells=（Cells/ml）×最初制備單細(xì)胞懸液的總體積
c，細(xì)胞活力值：Viability（%）=（總細(xì)胞數(shù)-總著色細(xì)胞數(shù)）/總細(xì)胞數(shù)×100
【注】：通常情況，健康的對數(shù)期培養(yǎng)細(xì)胞，活細(xì)胞至少占到95%。

注意事項
1）細(xì)胞計數(shù)前需對細(xì)胞進(jìn)行充分的清洗，因為細(xì)胞對血清蛋白具有非常高的親和力，殘留血清蛋白會導(dǎo)致較暗的染色背景。
2）臺盼藍(lán)對人體有害，請注意小心防護(hù)。
3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：室溫，有效期2年

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！