"HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞背景資料:該細胞由E.V.Gaffney及其同事從一位沒有乳癌家族史的供者乳汁中建立,培養(yǎng)出來的細胞染色體組型在第7代時就不正常;電鏡照片顯示有微絲、張力原纖維和橋粒;Southern轉移表明有整合型SV40病毒基因,當作正常細胞。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內無CO2;2)培養(yǎng)箱內溫度波動太大;3)細胞凍存或復蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞生長:貼壁
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
我??吹揭粋€比較復雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
NeHepLxHT細胞系相關產(chǎn)品:SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
H-727細胞系相關產(chǎn)品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
IPEC-J2細胞系相關產(chǎn)品:NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
Y3-Ag123細胞系相關產(chǎn)品:C4-1細胞、SK RC 20細胞、Hep-G2/C3A細胞
HT1080細胞系相關產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
細胞形態(tài)特性:上皮樣
體內細胞培養(yǎng)及其操作步驟:【瘤細胞懸液接種】1)無菌選取生長良好(有光澤,淡紅色)瘤組織或對數(shù)生長期培養(yǎng)瘤細胞;2)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨,經(jīng)80~100目篩網(wǎng)過濾成細胞懸液;3)培養(yǎng)細胞應用PBS洗兩遍;4)計數(shù)并調整細胞濃度至107~108/ml;5)常規(guī)消毒后,于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細胞懸液(0.1ml/部位,>106細胞)。初次接種成功率低,細胞數(shù)盡可能多一些;6)次日注意觀察動物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期,以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短,最后固定為一個相對穩(wěn)定的時間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實體瘤細胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤細胞,將這種腹水反復傳代,即可成為腹水瘤。初次傳代時,腹水常呈血性(含大量紅細胞),反復傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。1)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細胞離心和洗滌,進行細胞計數(shù);2)消毒動物,左下腹穿刺接種106腹水瘤細胞;3)接種腹水瘤細胞后約7~12d,待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9號針頭抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水經(jīng)3000rpm離心15min,收集上清,分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
PANC-08-13細胞系相關產(chǎn)品:SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞
OUMS23細胞系相關產(chǎn)品:LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品:HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
10T1/2細胞系相關產(chǎn)品:BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
HCC-78細胞系相關產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
SNG-M細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL5細胞、OVCA432細胞、CCC-HIE-2細胞
PG13細胞系相關產(chǎn)品:MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
SCaBER細胞系相關產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
293/EBNA細胞系相關產(chǎn)品:LS-180細胞、Line 870 Emory University-4細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞
CAL27細胞系相關產(chǎn)品:MDA MB 231細胞、R.K.13細胞、TO175T細胞
Swiss 3T3細胞系相關產(chǎn)品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
NCI-BL1339細胞系相關產(chǎn)品:Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
Jurkat, Clone E6-1細胞系相關產(chǎn)品:H2452細胞、HEYA8細胞、MC3T3E1細胞
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
CAOV3細胞系相關產(chǎn)品:CEL細胞、ACHN細胞、B16-F1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞系相關產(chǎn)品:OCILY10細胞、RCC23細胞、CRFK細胞
DoHH2細胞系相關產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
DoHH2細胞系相關產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
NCI-H211細胞系相關產(chǎn)品:H22細胞、JG細胞、P3 (Jiyoye)細胞
CP-70細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97-H細胞、SNU-5細胞、UMC-11細胞
HeLaS3細胞系相關產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細胞、HCC0202細胞、AC29細胞
H520細胞系相關產(chǎn)品:EoL-1 cell細胞、NCIH660細胞、MLA-144細胞
3T3-J2細胞系相關產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 1細胞、C-127細胞、VK2細胞
LOUNH91細胞系相關產(chǎn)品:CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
HSF細胞系相關產(chǎn)品:C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
E6-1細胞系相關產(chǎn)品:FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
C3A細胞系相關產(chǎn)品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
SK Mel28細胞系相關產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
H647細胞系相關產(chǎn)品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
CCD-841CoTr細胞系相關產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
RMS 1598細胞系相關產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞
MEG01細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR4細胞、Hs706T細胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞
BEAS2B細胞系相關產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
DKMG細胞系相關產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
253J B-V細胞系相關產(chǎn)品:MNNG/HOS Cl #5細胞、HEC-1A細胞、H838細胞
WM-451Lu細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
Ketr3細胞系相關產(chǎn)品:HRA19細胞、VE細胞、RPMI7666細胞
Hs832.Tc細胞系相關產(chǎn)品:Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
CL1.0細胞系相關產(chǎn)品:COR-L 105細胞、M14-MEL細胞、MMAc-Serum Free細胞
H-2195細胞系相關產(chǎn)品:H-226細胞、Hs683細胞、D324 Med細胞
JurkatE6-1細胞系相關產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
C8166細胞系相關產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
HCA-7細胞系相關產(chǎn)品:VP267細胞、Hep G2-Luc細胞、PBL細胞
A3細胞系相關產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞
CFPAC-1細胞系相關產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
LS123細胞系相關產(chǎn)品:HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
B-cell with DC Morphology細胞系相關產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞
YAC-1細胞系相關產(chǎn)品:THLE-3細胞、Hu-P-T3細胞、THP 1細胞
HUCCT1細胞系相關產(chǎn)品:Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
MT-2J細胞系相關產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
2B4-L細胞系相關產(chǎn)品:SKNF1細胞、Hs 343.T細胞、GM04680細胞
NRK細胞系相關產(chǎn)品:DC2.4細胞、Sp2/O-Ag14細胞、NCTC-3960細胞
SNU-16細胞系相關產(chǎn)品:2E8細胞、JurkatE6-1細胞、X63-Ag8.653細胞
HCC-1588細胞系相關產(chǎn)品:H-2087細胞、ARH77細胞、KU 19-19細胞
HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
NCI-SNU-520細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
HAVSMC細胞系相關產(chǎn)品:HCC95細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞、Colon-38細胞
MAD109細胞系相關產(chǎn)品:Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
QGY-7703細胞系相關產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
C1R細胞系相關產(chǎn)品:HEK-293細胞、UMNSAH-DF1細胞、NOR 10細胞
SAS細胞系相關產(chǎn)品:GA-10-Clone-4細胞、NPA細胞、H-650細胞
NCIH520細胞系相關產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
H-1651細胞系相關產(chǎn)品:A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞
VM-CUB-1細胞系相關產(chǎn)品:BT-483細胞、SF-126細胞、AU565細胞
MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品:P3J細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NIHOVCAR3細胞
L-Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、EA.hy 926細胞、RCC10細胞
MPP89細胞系相關產(chǎn)品:HNEpC細胞、WM-2664細胞、Jeko1細胞
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關鍵字: HBL-100 Adherent人整合SV40基因的乳腺上皮細胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標準實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術團隊,提供超過100000的生物、化學產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領域。公司秉承“客戶至上、服務一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質的產(chǎn)品和服務提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內外各種品牌的高品質試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。