"769-P Thawing人腎癌細胞系
細胞背景資料:該細胞系1975年建系,源自一位63歲白人女性的初期透明細胞腺癌組織,細胞呈圓形且邊界不清,核漿比大,有微絨毛及橋粒。該細胞可在軟瓊脂上生長。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
769-P Thawing人腎癌細胞系
細胞生長:貼壁
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下:1)冷凍時細胞密度過低:推薦的解決方案:縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后,立即將凍存管浸入在37℃的水浴中,并震蕩至全部融化,然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中;2)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程:推薦的解決方案:解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù),并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下:1)培養(yǎng)瓶的大小:一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中,使細胞密度上升;如,根據(jù)培養(yǎng)基的體積,從T75培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到2或3個T25培養(yǎng)瓶中;2)細胞密度過低:通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度,或使用較小的培養(yǎng)容器,或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4—1:12傳代,2—3天換液一次
在細胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題,客戶遇到的問題從細胞生長角度來說,針對細胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細胞生長不好》可能原因:細胞本身的狀態(tài)》1)細胞傳代次數(shù)多,細胞老化;2)細胞的接種量:接種量過低,細胞生長緩慢;3)細胞傳代時間過晚:細胞中毒,影響傳代后的細胞生長;4)胰酶消化時間過長或過短:時間過長,細胞死亡;時間過短,細胞未完全分離而成團,細胞死亡;5)細胞的凍存與復(fù)蘇:慢凍速融。污染:1)支原體污染;2)霉菌污染;培養(yǎng)基或血清:1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證;2)選擇的培養(yǎng)基是否合適;3)培養(yǎng)基配制是否準確無誤;培養(yǎng)環(huán)境:1)CO2供應(yīng)是否正常;2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確;解決方法:根據(jù)以上四個方面的可能原因,做出針對性的解決方案》1)注意細胞的本身狀態(tài):如傳代次數(shù)、接種量等;2)避免產(chǎn)生污染(用正規(guī)、合法、可溯源的血清);3)要用合適的血清或培養(yǎng)基,經(jīng)過驗證;4)注意實驗室的環(huán)境;二、培養(yǎng)細胞死亡》可能原因:1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2;2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大;3)細胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷;4)培養(yǎng)液滲透壓不正確;5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積;解決方法:1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2;2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度;3)取新的保存細胞種;4)檢測培養(yǎng)液滲透壓;5)換入新鮮培養(yǎng)液。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
769-P Thawing人腎癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
我??吹揭粋€比較復(fù)雜的四步消化法,這個挺有意思,我也是次聽說,應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法,很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近300株細胞里面,還沒遇到這么怪異的。比如Caco2其實是很好消化的細胞,不需要胰酶孵育即可,只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好,這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好;比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),就以colon cancer為例,比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞
LOUNH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-112 CoN細胞、HSC-T6細胞、Vx-2細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
HCCC-9810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
TMK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
OV90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細胞、MDAMB175細胞、OVCAR 5細胞
CTLL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-19-19細胞、SLMT-1細胞、MC9細胞
C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、Panc_03_27細胞、J-111細胞
PL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM細胞、J82COT細胞、SV40-HCEC細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
beta TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1788細胞、HUVEC-C[HUVEC]細胞、STTG1細胞
HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
SKMEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker256細胞、ST 486細胞、MC3T3-E1細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
CPAE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSRC2細胞、LS411細胞、SW48細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
769-P Thawing人腎癌細胞系
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
SKNBE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
Hs281T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細胞、T9細胞、MC3T3-E1 Subclone 4細胞
NB1-RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
SU-DHL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細胞、Oka-C1細胞、TMD8細胞
TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
H-2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細胞、NCI-H102細胞、Reh細胞
Farage Original Line細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細胞、HO1N1細胞、HEL 299細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
Colon38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細胞、RC13細胞、JF305細胞
T-84細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
NRK-49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL 28細胞、SK-N-BE細胞、MCCAR細胞
NCIH378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320-DM細胞、COS-7細胞、EC9706細胞
Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞
NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞
NCI-H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6細胞、H-7721細胞、HT55細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
COC1/CDDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81A-1細胞、IFRS1細胞、DHL-6細胞
NR8383.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH520細胞、COC1/CDDP細胞、A2058細胞
OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
FF-WT-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
WRL-68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
HA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細胞、UCW 100細胞、SCC VII細胞
RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
U2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL95細胞、Rat-1細胞、HUT-226細胞
769-P Thawing人腎癌細胞系
NK 10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1734細胞、alpha TC1.6細胞、MPP-89細胞
CFSC-8B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細胞、HCAEC細胞、M20 [Human melanoma]細胞
rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞
HBSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細胞、SW1222細胞、CWR22R細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
TE-671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM8細胞、P3/NS1/Ag4-1細胞、ROS 17/28細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞
NPC-TW 039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
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