"MKN45 Thawing人胃癌細胞系
細胞背景資料:該細胞系由S Akiyama建立,源于一位35歲患有印戒細胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。
細胞形態(tài):上皮細胞樣
MKN45 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長:貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MKN45 Thawing人胃癌細胞系
細胞生長特性:貼壁+懸浮
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8402細胞、NIH3T3細胞、C 643細胞
H-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK;293細胞、KM932細胞、HS578細胞
GM02131A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F10細胞、PLC-8024細胞、MDA MB 453細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
COV-362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAEC細胞、MKN45細胞、PLB 985細胞
PL 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 266細胞、HT144-mel細胞、D10.G4.1細胞
SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
BALB/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573細胞、HEL 92.1.7細胞、T9細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、NCI-522細胞、HCT.116細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細胞、CEM/0細胞、SKRC-39細胞
293 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC5細胞、NCI-H2291細胞、H-125細胞
H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞
mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞
SNU216細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MyLa 2059細胞、DI-TNC1細胞、HeLa細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
U343細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞
ONS76細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCam 2細胞、He-La細胞、MG63細胞
TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
MKN45 Thawing人胃癌細胞系
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
CAL62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細胞、NCI-H-82細胞、AgC11x3A細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
SK-RC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
TE-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
A.704細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細胞、16HBE140細胞、HSC-2細胞
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
DMS-273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840_T細胞、2780細胞、201T細胞
MGHU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細胞、MDA-MB-415細胞、RC-K8細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
JiyoyeP-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M14細胞、B5537SKIN細胞、Panc813細胞
EBTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細胞、SNU869細胞、TSU-Pr1細胞
HCV-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E.L.4細胞、NCI-H-295細胞、Hmy.2 CIR細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
K562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
BC-024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-UI細胞、SUM 159細胞、MV-1-Lu細胞
H-1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細胞、Caki-2細胞、MFM-223細胞
GM-637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
MC3T3-E1 Subclone 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8.653細胞、FLS細胞、DMS 53細胞
SNU-1040細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
NCIH1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
Normal fibroblast-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細胞、PNT1A細胞、JVM-2細胞
MKN45 Thawing人胃癌細胞系
HDLM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-115細胞、HIC細胞、Duke University 4475細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
RPMI6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細胞、MPP89細胞、DH 82細胞
HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
HCC 2185細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1930細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞、N2a細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
Caco-2/BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細胞、RA-FLSs細胞、SK HEP-1細胞
HCC 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3-1細胞、SK-MEL28細胞、AC16 [Human hybrid]細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
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