背景^[1][2]

熱休克蛋白（heat shock protein, HSP）是在各種應(yīng)激因素特別是高溫環(huán)境因素的誘導(dǎo)下產(chǎn)生的一類蛋白質(zhì)，廣泛存在于人、動(dòng)物、微生物和植物的細(xì)胞中，能提高細(xì)胞對(duì)抗各種損傷因素的能力，并促進(jìn)細(xì)胞對(duì)各種刺激所造成的損傷進(jìn)行自身修復(fù)，具有重要的生物學(xué)功能，并與腫瘤細(xì)胞的增殖密切相關(guān)，HSPs- 肽復(fù)合物通過活化體內(nèi)多個(gè)CTL 克隆，可望特異殺傷同一種腫瘤內(nèi)所有腫瘤細(xì)胞，打破免疫耐受，消滅殘存瘤組織，克服目前腫瘤中難以解決的抗原多變性及細(xì)胞異質(zhì)性等困難。

根據(jù)其分子量的不同，可分為HSP110，HSP90，HSP70，HSP60 及小分子熱休克蛋白亞家族。HSP60是HSPD1基因的產(chǎn)物，較早的研究認(rèn)為HSP60是線粒體內(nèi)分子伴侶(也被稱為Cpn60)。在生理?xiàng)l件下HSP60有輔助新生非折疊或錯(cuò)誤折疊的多肽達(dá)到一種天然構(gòu)象的重要作用，并且與線粒體HSP10協(xié)同作用(HSP10也位于線粒體內(nèi)并被稱為Cpnl0)。HSP60主要定位于細(xì)胞線粒體內(nèi)，生理狀態(tài)下，協(xié)助細(xì)胞多肽或蛋白質(zhì)正確轉(zhuǎn)運(yùn)、折疊和裝配。

近年發(fā)現(xiàn)HSP60與癌癥形成有關(guān)，可促進(jìn)腫瘤生存和增生 ；其表達(dá)與腫瘤的惡性程度和復(fù)發(fā)性淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤的形成有關(guān) ；具有腫瘤診斷和推斷預(yù)后等作用。有研究利用人Rb石蠟切片研究HSP60在未接受治療的Rb患者視網(wǎng)膜內(nèi)原發(fā)Rb細(xì)胞和脈絡(luò)膜、視神經(jīng)等侵襲部位的Rb細(xì)胞的表達(dá)差異，初步分析了HSP60在Rb細(xì)胞的定位特點(diǎn)及其與Rb細(xì)胞凋亡的關(guān)系和可能的作用機(jī)制。結(jié)果表明Rb腫瘤細(xì)胞在從視網(wǎng)膜內(nèi)向外侵襲的過程中，通過升高HSP60、減少凋亡來促進(jìn)侵襲部位腫瘤細(xì)胞的存活。

HSP60小鼠單克隆抗體通過免疫HSP60重組蛋白獲得，可用于WB（1:1000-1:10000）、IP（1:1000-1:10000）、IHC（1:20-1:200）、IF（1:20-1:200）。 HSP60小鼠單克隆抗體-20℃保存，Western-抗稀釋液-20℃或4℃保存，一年有效。Western一抗稀釋液優(yōu)先推薦4℃保存，長(zhǎng)期不使用可以考慮-20℃保存，但凍融可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)輕微的渾濁和少量不溶物。

如果HSP60小鼠單克隆抗體用于Western blot (WB)、免疫熒光(IF)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)注意回收使用過的稀釋抗體?；厥盏目贵w通常至少可以重復(fù)使用5-10次。稀釋后的抗體，包括已經(jīng)使用過的稀釋抗體，4℃保存。回收后重復(fù)使用的抗體，使用方法同新鮮稀釋的抗體。如果在重復(fù)使用過程中發(fā)現(xiàn)抗體出現(xiàn)輕微混濁現(xiàn)象，可以10000g離心1-3分鐘，取上清用于后續(xù)檢測(cè)。

如果回收的抗體出現(xiàn)明顯的絮狀物或長(zhǎng)霉長(zhǎng)菌等情況，則可以考慮廢棄該抗體。 提供的Western一抗稀釋液也可以用于免疫熒光(IF)、免疫組化(IHC)、免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)等適當(dāng)用途。如果希望獲得的檢測(cè)效果，請(qǐng)考慮使用上述檢測(cè)專用的一抗稀釋液。

主要參考資料

[1] 羅鑫, 丁運(yùn)剛, 葉慧菁, 等. HSP60 在人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤中表達(dá)的研究[J]. 眼科新進(jìn)展, 2015, 35(6): 549-553.

[2] 吳大鵬, 胡治平, 楊和平. 熱休克蛋白 20 與高爾基體在沙鼠前腦缺血再灌注后的變化及相關(guān)性[D]. 中華醫(yī)學(xué)會(huì), 2012.