關(guān)鍵詞：生物緩沖劑、HEPES、4-羥乙基哌嗪乙磺酸
HEPES中文全稱 4-羥乙基哌嗪乙磺酸，CAS號為：7365-45-9，pH 緩沖范圍6.8 - 8.2 ，在25℃下，其pKa 值為7.5。HEPES-Na即N-(2-羥乙基)哌嗪-N'-(2-乙磺酸)鈉鹽，其CAS號為75277-39-3。HEPES和HEPES-Na都是非常重要的生物緩沖劑，在生物制藥、醫(yī)療診斷等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。
HEPES是一種兩性離子緩沖劑，應(yīng)用于針對各種類型有機體的細胞培養(yǎng)基、蛋白質(zhì)研究，還可用于生化診斷試劑盒、DNA/RNA提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里，因具有對細胞無毒性作用且能長時間控制恒定的pH范圍等優(yōu)點，常備用作化妝品添加劑，起到活性劑、脫皮劑、促透劑等作用。
HEPES和HEPES-Na的區(qū)別：HEPES-Na又稱有機HEPES堿，與HEPES是共軛酸堿的關(guān)系，兩者本質(zhì)上一樣，不過兩種物質(zhì)溶解后的pH不同。
HEPES的制備方法：
關(guān)于HEPES緩沖溶液的配制,根據(jù)用途配制,一種是單純的HEPES＋NaOH,另一種是HEPES＋鹽。各種配制方法總結(jié)如下：
一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液調(diào)節(jié)至少所需pH（HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2）,然后用蒸餾水定容至500ml,于4攝氏度保存。
二、加少量鹽的HEPES Buffer配方（500ml）
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調(diào)節(jié)pH值,最后定容。
三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制
將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水,用0.5M NaOH調(diào)節(jié)至所需pH值,再用蒸餾水定容至100ml即可。
HEPES-Na的制備方法：
HEPES-Na可以通過4-羥乙基哌嗪與乙烯基磺酸鈉合成，也可以采用羥乙基磺酸、氫氧化鈉及4-羥乙基哌嗪高壓合成，目前符合生物緩沖劑要求的最廣泛的制備方法是將HEPES與NaOH反應(yīng)生成HEPES-Na。具體制備步驟如下：
氮氣保護下將純度在90-99%之間的HEPES和NaOH固體或溶液進行反應(yīng)0.2-1小時，反應(yīng)溫度為20-100℃，反應(yīng)完成后，將所得產(chǎn)物進行脫色、過濾、濃縮、除水、結(jié)晶、洗滌、干燥等操作，得到HEPES-Na。
這種制備方法工藝簡單，操作方便，且所得HEPES-Na產(chǎn)物收率高，產(chǎn)品純度高,可達到生物緩沖劑的純度要求。
博億研發(fā)生產(chǎn)生物緩沖劑系列產(chǎn)品（TRIS、HEPES、CAPS、MOPS、PIPES）有15年經(jīng)驗，在采血管添加劑（肝素鋰、肝素鈉、二鉀、三鉀），顯色試劑（TOOS、MAOS、TOPS、ALPS），化學(xué)發(fā)光試劑（魯米諾、異魯米諾、吖啶酯）有較深的研究，選料生產(chǎn)包裝層層把關(guān)，堅持為客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品原料。